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84農業(yè)網 時間：2018-03-15 作者：佚名 來源：網絡整理
人工栽培天麻，在有性繁殖過程中，需要萌發(fā)菌和蜜環(huán)菌兩種共生菌。筆者在生產實踐中，摸索出兩種共生菌都能生長的培養(yǎng)基及生產技術。具體做法如下。
1培養(yǎng)基配制
1.1液體培養(yǎng)基馬鈴薯（挖去芽眼、去皮、切片）100g，硬雜木屑、麥麩、玉米面各50g，自來水或天然水1300mL，在雙重鍋內煮沸30分鐘后用雙層紗布過濾。取濾液補水至1000mL，加葡萄糖20g、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂1g、蛋白胨0.5%、10mLVB1。全部溶解搖均后，分裝于500mL的三角瓶或罐頭瓶內，每瓶裝150mL左右，也可裝于試管內，裝入量為試管容積的1/4。三角瓶和試管用棉花塞口，罐頭瓶用2層牛皮紙或4層報紙上蓋一層塑料布封口后，用皮筋扎口。特點：技術含量高，繁殖快，長好即可應用，但不能長期保存。
1.2固體斜面培養(yǎng)基是食用菌生產中常用的培養(yǎng)基，按照“1.1”的操作程序制取濾液，在濾液中加入瓊脂18g，加熱溶化并補水至1000mL，趁熱加入葡萄糖20g、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂1g、蛋白胨5g、10mgVB1，全部溶解搖均，分裝于試管內，裝量為試管容量的1/4，然后用棉花塞口。
1.3木屑培養(yǎng)基硬雜木屑50%、玉米芯（粉碎成小顆粒狀）25%、麥麩15%、玉米面10%，外加葡萄糖0.5%、蔗糖0.5%、石膏1%、石灰0.5%、磷酸二氫鉀0.2%、硫酸鎂0.1%、2%VB1。將原料和石膏、石灰等干料拌均，再將上述可溶解的所有輔料溶于水中并拌入原料中，使之含水量為70%，充分拌均后裝入試管，并適當壓實。裝入量為試管容積的1/2，然后用棉花塞口。特點：耐貯藏，便于郵寄。
2滅菌
用手提式高壓滅菌鍋，也可用民用高壓鍋代替。
2.1液體和斜面固體培養(yǎng)基滅菌時，蒸汽壓力為1.4kg/平方厘米時穩(wěn)定保持30分鐘，待鍋內溫度降到50～70℃時出鍋。液體培養(yǎng)基出鍋后直接放入接種箱中，待溫度降到25℃以下時接種；斜面固體培養(yǎng)基需趁液體狀態(tài)時傾斜成斜面（斜面長度約占試管長的3/5），待培養(yǎng)基自然凝固后移入接種箱。
2.2木屑培養(yǎng)基滅菌時，蒸汽壓力在1.4kg/平方厘米時穩(wěn)定保持45～60分鐘，自然降溫后，出鍋直接放入接種箱。
注意：滅菌鍋應事先加足水，開鍋后一定要待內部冷空氣排盡后再壓閥，達到壓力后，調小熱源，維持壓力。滅好菌后，降壓不能過急，以防沖掉棉塞。
3接種
必須在無菌條件下，嚴格按照無菌操作要求進行。
3.1接種液體培養(yǎng)基只需從母種試管內挑取花生米大小的1～2塊母種（帶有菌絲的種塊）接入三角瓶中。接入試管液體培養(yǎng)基時，種塊可小一些。
3.2接種斜面培養(yǎng)基蜜環(huán)菌需趁斜面有凝結水時接種，凝結水有利于蜜環(huán)菌萌發(fā)。每支試管斜面上接入1～3塊母種；接種萌發(fā)菌時，需待培養(yǎng)基表面無凝結水時再接種。每支試管斜面上接入1～2塊母種。
3.3木屑培養(yǎng)基培養(yǎng)基滅菌后不能存放，需盡快接種。接種時，要用接菌鉤適度推壓種塊，使其與培養(yǎng)基緊密接觸，以利菌種萌發(fā)生長，接種后需立放。
4培養(yǎng)
接種后，盡快放入恒溫箱或培養(yǎng)室內，在22～24℃的條件下恒溫培養(yǎng)。
4.1液體種在培養(yǎng)過程中，從第2天開始啟動搖床振蕩培養(yǎng)；手工操作時，每天需手工搖動6～8次。如果是試管裝，搖動后需斜放，7天左右即可終止培養(yǎng)（萌發(fā)菌比蜜環(huán)菌的培養(yǎng)時間要多2～3天），應盡快用于生產。成熟的培養(yǎng)液應是清澈透明、淡茶色或土黃色。如果渾濁、液面膜狀或呈大量泡沫狀即是雜菌污染，應廢掉。
4.2斜面種培養(yǎng)時需平放，48小時左右可看出菌絲萌動并逐漸向周圍輻射延伸。當10～15天菌絲貫穿斜面培養(yǎng)基（萌發(fā)菌培養(yǎng)時間需長一些）時即可用于生產。置于0～4℃的冰箱內，蜜環(huán)菌可保存40天，萌發(fā)菌可保存60天。
4.3木屑種接種后需豎立放置培養(yǎng)，防止種塊振動，經15～20天培養(yǎng)，蜜環(huán)菌菌索或萌發(fā)菌菌絲貫穿到瓶底時，即可用于生產。置于0～4℃的冰箱內保存，6個月質量不變。經冰箱內久存的木屑菌種用于生產時，為防止接種時感染雜菌，可從試管底部破管取種接種。
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