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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間:2018-03-14 作者:佚名 來源:網(wǎng)絡(luò)整理
本病可根據(jù)流行病學(xué)、典型癥狀及病變,即小鴨發(fā)病死亡、發(fā)病急、死亡快、死亡時(shí)間集中以及肝臟有明顯的出血點(diǎn)或出血斑等即可作出初步診斷。
確診尚需進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn),主要包括:
(一)病毒分離
以無菌操作法取病死鴨肝,按常規(guī)處理后接種9~11日齡雞胚或10~12日齡鴨胚(無母源抗體),觀察24h~124h胚體死亡情況,收集死亡胚的尿囊液作為待鑒定病毒分離物。
(二)病原鑒定
1.中和試驗(yàn),已知陽性血清具有中和DHV致死雞胚或鴨胚的能力。
2.血清保護(hù)試驗(yàn):用1~5日齡易感雛鴨,每只皮下注射1ml~2ml陽性血清,1d~3d后用0.2ml~0.5ml病毒分離物或處理好的病料肌注。接種DHV陽性血清的雛鴨保護(hù)率達(dá)80%~100%,而對(duì)照鴨死亡率50%以上。
以上這兩種試驗(yàn)實(shí)用、特異性高,但所需時(shí)間較長(zhǎng),是目前用于診斷或血清流行病學(xué)調(diào)查的常規(guī)方法。
(三)其他血清學(xué)診斷方法
1.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Dot-ELISA),可用于鑒定分離物和病料中的DHV或檢測(cè)血清中的抗體,其特點(diǎn)是快速、敏感、特異性好,其中Dot-ELISA比ELISA更為簡(jiǎn)便。
2.膠體金免疫電鏡技術(shù)檢測(cè)DHV,具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏、特異性好、直觀等特點(diǎn)。與Dot-ELISA與ELISA相比,膠體金免疫電鏡技術(shù)檢測(cè)DHV更為直觀。
3.SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)快速檢測(cè)DHV,該法需要樣品中強(qiáng)毒含毒量達(dá)1000LD50/0.2ml(1日齡雛鴨)時(shí)才出現(xiàn)陽性;弱毒疫苗樣品中需含1×104LD50/0.2ml(9日齡雞胚)才出現(xiàn)陽性。具有特異、簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn),特別適合于臨床檢測(cè)肝臟樣品和實(shí)踐中對(duì)疫苗含毒量的檢測(cè)。
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