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84農業(yè)網 時間：2018-03-14 作者：佚名 來源：網絡整理
細胞質雄性不育（cytoplasmicmalesterility，CMS）廣泛存在于高等植物中，它不僅在植物雜種優(yōu)勢利用方面具有重要價值，而且在研究核質互作方面具有重要的理論意義。其母性遺傳的特點表明它可能同葉綠體或線粒體有關，現有的研究結果表明，大多數植物的CMS主要與線粒體有關。
提取高質量的線粒體DNA（mitochondrialDNAmtDNA）是進行線粒體基因組研究的前提，而從健壯的黃化苗中提取mtDNA可以減少細胞質中葉綠體基因組的污染，從而更加嚴謹地分析線粒體基因組。本文以白菜為例介紹一種簡單的高質量的黃化苗培養(yǎng)方法。
首先采用0.1～0.2cm孔徑的蛭石為基質，洗凈后平鋪于干凈的育苗盤中，厚度約1cm。白菜種子浸種1～2h后播種，用種量約120g/平方米。播種后覆蓋0.5cm的基質，輕輕壓實。育苗盤置于暗室中，在晝/夜溫為26℃/20℃下培養(yǎng)。每天噴水保持基質濕潤，培養(yǎng)1周即可獲得健壯黃化苗。
因mtDNA的提取材料少，取材麻煩，工作量大，而采用0.1～0.2cm孔徑的蛭石，通氣性好，同時可以減少出苗時的“帶帽率”及取材時苗根部沾染的基質量，這樣就大大減少工作量，提高效率。播種量依不同作物有所不同，播種量太大容易導致苗徒長，瘦弱苗不利于mtDNA的提取，而播種太稀又影響到mtDNA的產量。培養(yǎng)中的變溫處理可適當減輕黃化苗的徒長，而生長過程中的水分控制更是培養(yǎng)中的關鍵，每天噴水1次，基質保持濕潤即可。
試驗證明，采用該方法培養(yǎng)1周即可獲得黃化苗750g/平方米，可以提取到25μgmtDNA，而且其純度較高，足以進行線粒體基因組的后續(xù)研究工作。
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